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小動物活體成像的實驗及標記技術分類

發布時間:2022-04-27      點擊次數:57
  小動物活體成像的實驗主要分為兩大類,一種是看腫瘤或者炎癥的發展以及腫瘤的轉移。一種是看物質在小鼠體內的代謝和聚集情況。比如藥物代謝,基本上是要看不同的時間內,注射進入小鼠體內的藥物到了小鼠的哪個部分的器官以及量的多少。
  那么如果單純是細胞或者是藥物,我們本身是無法看見的。這就牽扯到,我們需要用到一些,可以被影像設備捕捉到的發光物質,對細胞或者藥物進行標記。從而指示細胞或者藥物在小鼠中存在的位置。
  小動物活體標記技術主要分為兩種,一種是生物發光,一種是熒光。生物發光是通過熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或者DNA。在拍照前注射進底物,通過化學反應進行自發光。這種方法,不需要激發光,具有特異性強,背景低等優點。缺點是,信號太弱,需要比較長的曝光時間,以及比較好的設備。
  熒光的主要采用報告基因(GFP,YFP,RFP)等。需要不同顏色的激發光源進行激發,并且在信號進行接收之前,要通過相對應的發射濾光片將雜光進行過濾,盡可能只是將激發信號放進來。GFP藍光激發,顯綠色,YFP綠光激發顯黃顏色,RFP黃光激發顯示紅色。所以舉個例子,GFP就需要藍色光源激發,需要綠色濾光片進行過濾。
  除此之外在藥物代謝實驗中,經常用到的一些熒光染料,用于對藥物進行標記。我們可以很容易的在網上查到這些染料的激發波長和發射波長。
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